安捷倫1260液相色譜 工作站的詳細(xì)操作方法

一、開(kāi)機(jī)：

1、打開(kāi)電腦；

2、打開(kāi)液相色譜各個(gè)模塊的電源；

3、雙擊桌面“LC1260(Online)"，進(jìn)入聯(lián)機(jī)界面；

二、排氣：

1、手動(dòng)旋開(kāi)泵處沖洗閥（逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)約1圈）

2、右鍵單擊“Pump"圖標(biāo)銷售，選擇“Method"選項(xiàng)，進(jìn)入泵編輯畫面，設(shè)流速：5ml/min，點(diǎn)擊“確定"；

3、右鍵單擊“Pump" 圖標(biāo)銷售，點(diǎn)擊“Control"選項(xiàng)，選中“ON"，點(diǎn)擊“確定"，則系統(tǒng)開(kāi)始沖洗，直到

管線內(nèi)（由溶劑瓶到泵入口）無(wú)氣泡為止（一般為5分鐘），切換通道繼續(xù)沖洗，直到所有要用通道

無(wú)氣泡為止；

4、右鍵單擊“Pump" 圖標(biāo)，點(diǎn)擊“Method"選項(xiàng)，設(shè)流速：0ml/min，手動(dòng)旋緊沖洗閥；

5、右鍵單擊“Pump"圖標(biāo)，點(diǎn)擊“Method"選項(xiàng)，按照方法要求選擇合適比例的流動(dòng)相，設(shè)流速：1.0ml/min；（不一定是1）；

6、同理右鍵單擊“Column Comp"，“DAD"圖標(biāo)，點(diǎn)擊“Method"選項(xiàng)，按照；

7、方法的要求設(shè)置溫度，波長(zhǎng)，點(diǎn)擊“控制" 選項(xiàng)，“ON"打開(kāi)柱溫箱和檢測(cè)器；

三、編輯方法：

1、點(diǎn)擊“Method"—— “Edit EntireMethod"開(kāi)始編輯完整方法；

2、選中除“Data Analysis "外的三項(xiàng)，進(jìn)入下一選項(xiàng)卡，選擇“Als"（自動(dòng)進(jìn)樣），點(diǎn)擊“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

3、選擇“Method"菜單下“Method Information"選項(xiàng)，在“Method Comments"中加入方法的信息（如：

This is for test!），選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

4、泵參數(shù)設(shè)定：右鍵單擊“Pump"圖標(biāo)，點(diǎn)擊“Method…"選項(xiàng)，設(shè)置“Flow"：如1.0ml/min；“Stop

Time"：如10 min（該停止時(shí)間僅為做一個(gè)樣品需要的時(shí)間），按照要求選擇合適比例的流動(dòng)相配

比，選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

5、自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定：右鍵單擊“Sampler"圖標(biāo)，點(diǎn)擊“Method"選項(xiàng)，選擇“Injection volume"，輸

入進(jìn)樣體積，選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

6、柱溫箱參數(shù)設(shè)定：右鍵單擊“Column Comp"，點(diǎn)擊“Method"選項(xiàng)，設(shè)置“Left"溫度（可設(shè)置溫度范

圍：低于室溫10℃-80℃），一般“Left"和“Right"溫度一致，選擇“Combined"綁定即可，“Stop

Time"選擇“As Pump /Injector"，選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

7、UV檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定: 右擊“DAD" ，點(diǎn)擊“Method…"選項(xiàng)，下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng)（可

根據(jù)需要選擇多個(gè)波長(zhǎng)，多可選8個(gè)波長(zhǎng)）；“Stop Time"選擇“As Pump /Injector"；“Spectrum"

——“Store"選項(xiàng)下，根據(jù)需要選擇 “None"或“All（全波長(zhǎng)掃描）"等選項(xiàng)，選擇“OK"，進(jìn)入下一選

項(xiàng)；

8、編輯方法完畢，從“Method"菜單中，選中“Save Method As"，輸入一方法名，選擇“OK"，保存方

法成功。

9、單針進(jìn)樣

10、從“Run Control"菜單中，選擇“Sample Information"選項(xiàng)，輸入“Operator Name"；在“Data File"中

選擇“Path"和 “Prefix/Counter（文件命名）"設(shè)置“Prefix（一般設(shè)置為年月日）"和“Counter"；輸

入“Location（樣品位置）"和“Sample Name"，選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

11、基線平穩(wěn)后選擇“Run Control"中的“Run Method"選項(xiàng)，開(kāi)始進(jìn)樣。

四、序列進(jìn)樣：

1、選擇“Sequence"菜單下“ Sequence Table"選項(xiàng)，在“Confiqure Table"中選擇需要選項(xiàng)，一般

為“Vial(樣品瓶)"，“Sample Name(樣品名稱)"，“Method Name(方法名稱)"，“Inj/Vial（進(jìn)樣次

數(shù)）"，“Sample Type（樣品類型）"，“Datafile（文件名）"和“Inj Volume（進(jìn)樣體積）"；

2、點(diǎn)擊“Inset"生成一行，設(shè)置上述參數(shù)，選中該行，點(diǎn)擊“Copy"和“Paste"復(fù)制后修改相應(yīng)參數(shù)，即

生成序列表，選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；

3、點(diǎn)擊“Sequence"菜單下“ Sequence Parameters"選項(xiàng)，選擇序列數(shù)據(jù)的“Path"（序列會(huì)自動(dòng)生成

以“序列名稱－時(shí)間"為名稱的文件夾保存數(shù)據(jù)），數(shù)據(jù)建議選擇 “Prefix/Counter"保存；

在“Shutdown"選項(xiàng)下選中“Post-Sequence Command/Macro"，根據(jù)需要選擇“PUMPALL OFF（序列

結(jié)束后關(guān)閉泵）"" “LAMPALL OFF（序列結(jié)束后關(guān)閉紫外燈）"" “STANDBY（序列結(jié)束后關(guān)閉紫外燈

和泵）"，選擇“OK"，進(jìn)入下一選項(xiàng)；（注：若“Path"中默認(rèn)保存于C盤，則可點(diǎn)擊“View"，選

擇“Preferences"，根據(jù)需要添加相應(yīng)的“SequenceTemplates"“Data"“Master Methods"保存路徑）

4、從“Sequence"菜單，選中“Save Sequence Template As"，輸入一序列名，選擇“OK"，即可；

5、基線平穩(wěn)后選擇“Run Control"中的“Run Sequence"選項(xiàng)，開(kāi)始序列進(jìn)樣。

（注：若中途停止運(yùn)行，則選擇“Run Control"中的“Stop Run/Inject/ Sequence"可保留圖譜信息，若選

擇Abort，則所有圖譜信息都丟失）

五、數(shù)據(jù)分析（脫機(jī)狀態(tài)使用）：

1、雙擊“LC1260（Offline）"圖標(biāo)進(jìn)入的脫機(jī)畫面

2、從“View"菜單中，點(diǎn)擊“Data Analysis"進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫面

3、從“File"菜單選擇“Load Signal"，選中所需的數(shù)據(jù)文件名，點(diǎn)擊“OK"，則數(shù)據(jù)被調(diào)出。

4、譜圖優(yōu)化：從“Graphics"菜單中選擇“Signal Options"。從“范圍" 中選擇“Full"或“Use Ranges" 選擇

所需“Time Range"和“Response Range"，選擇“OK"；從“Integration"中選擇“Integration Events"，調(diào)

整“Area Reject"和“Height Reject"刪除雜峰；點(diǎn)擊“Set Integration"圖標(biāo)，可選擇性消除不需要的積

分，若想消除該操作，則選擇“Method Manual Events"上排左起第5個(gè)圖標(biāo)進(jìn)行移除操作即可，點(diǎn)擊

左邊“√"圖標(biāo)，將積分參數(shù)存入方法并退出“Integration Events"。

（注：“Set Integration"圖標(biāo)為）

六、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：

1、選擇“Calibration"菜單下“New Calibration Table"，選擇“Automatic Setup"中“Level（即標(biāo)曲中對(duì)應(yīng)

的點(diǎn)，個(gè)點(diǎn)即為1）"和“Defanlt Amount（標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)點(diǎn)的濃度）"，選擇“OK"；

2、通過(guò)選擇“Calibration"菜單下的“Add Level"選項(xiàng)依次添加各點(diǎn)參數(shù)，若為外標(biāo)法，在“ISTD"項(xiàng)下

選“NO"，若為內(nèi)標(biāo)法則選“Yes"；“#"項(xiàng)下對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)無(wú)的數(shù)字的應(yīng)統(tǒng)一；若想更改標(biāo)準(zhǔn)曲線中

的對(duì)應(yīng)點(diǎn)；

3、選擇“Calibration"菜單下的“Recalibrate"項(xiàng)的“Mode"選項(xiàng)，選擇“Average"則表示取當(dāng)前點(diǎn)與標(biāo)曲

中對(duì)應(yīng)點(diǎn)的平均值替代標(biāo)曲中原對(duì)應(yīng)點(diǎn)，若選擇“Replace"則表示將當(dāng)前點(diǎn)取代標(biāo)曲中對(duì)應(yīng)點(diǎn)；

（注：修改“Defanlt Amount"中濃度單位的方法：選擇“Calibration"項(xiàng)下“Calibration Setting"，修

改“Amount Units"，設(shè)置濃度單位；選擇“Calibration"項(xiàng)下“Calibration Setting"，修改“Default

CalibrationCurve"，選擇合適的曲線類型-Type，是否過(guò)原點(diǎn)-Origin和各點(diǎn)對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的比重-

Weight，通常選Equal）

4、調(diào)出樣品譜圖，點(diǎn)擊需要計(jì)算濃度的色譜峰，選擇“Report" 菜單中的“Specify Report"，選

擇“Report style"為“Detail"，點(diǎn)擊“OK"后選擇“打印預(yù)覽"圖標(biāo)，在報(bào)告中即可體現(xiàn)計(jì)算結(jié)果。

七、 圖譜重疊設(shè)置：

1、選擇“File"菜單下“Overlay Signal"選項(xiàng)，選擇任意需要重疊的圖譜；

2、在“Signal"選項(xiàng)下，選擇“3D Signal Overlay"圖標(biāo)（緊鄰圖譜上方左起第四個(gè)圖標(biāo)），在彈出

的“Adjust Signal OverlayOptions"對(duì)話框中調(diào)節(jié)交錯(cuò)時(shí)間和高度；若想移除重疊譜圖，點(diǎn)擊第六個(gè)圖

標(biāo)。

八、信噪比等參數(shù)計(jì)算：

1、選擇“Report"菜單中的“System Suitability"項(xiàng)下的“Edit Noise Range"選項(xiàng)，設(shè)置時(shí)間范圍（超過(guò)

1min）；

2、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report"，選擇“Report style"為“Perfomance+Noise"，點(diǎn)

擊“OK"后，即可預(yù)覽信噪比參數(shù)；

3、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report"，選擇“Report style"為“Extended Perfomance"，點(diǎn)

擊“OK"后，即可預(yù)覽對(duì)稱性、拖尾因子等所有參數(shù)。

九、程序運(yùn)行時(shí)檢測(cè)出峰情況：

選擇“File"菜單下的“Snapshot"選項(xiàng)即可。

十、打印報(bào)告：

1、從“Report"菜單中選擇“Report Mode"，選擇“Use Classic Reporting"；

2、從“Report"菜單中選擇“打印報(bào)告"，則報(bào)告結(jié)果將被打印。

十一、關(guān)機(jī)：

1、沖洗色譜柱和系統(tǒng)后，退出化學(xué)工作站及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)；

2、關(guān)閉Agilent 1260各模塊電源開(kāi)關(guān)。