Millipore MERS00002 細(xì)胞電阻儀科研應(yīng)用指南

——跨上皮/內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能研究的精準(zhǔn)測量方案

一、儀器原理與核心功能

1.1 電阻測量技術(shù)原理

TEER（跨上皮電阻）檢測：

采用 AC 4-electrode系統(tǒng)（頻率12.5Hz），避免電極極化

測量范圍：0-20,000 Ω·cm2（分辨率1 Ω·cm2）

自動溫度補償（18-40℃）

1.2 關(guān)鍵技術(shù)創(chuàng)新

特性 MERS00002優(yōu)勢 傳統(tǒng)伏歐計局限

電極設(shè)計 鍍金叉指電極（防腐蝕） 銀電極易硫化失效

自動化校準(zhǔn) 一鍵校準(zhǔn)（含空白補償） 需手動計算凈電阻值

多孔板兼容性 支持6/12/24-well inserts 僅適配單孔測量

1.3 典型研究應(yīng)用

屏障模型構(gòu)建驗證：

? 腸上皮（Caco-2）、血腦屏障（hCMEC/D3）

? 肺部藥物滲透性評估

? 緊密連接調(diào)控研究（如Claudin敲除影響）

二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程

2.1 實驗前準(zhǔn)備

電極維護(hù)：

復(fù)制

1. 使用后立即用去離子水沖洗  

2. 每月用70%乙醇消毒10分鐘  

3. 避免觸碰電極敏感區(qū)（圖示紅色區(qū)域）  

2.2 測量步驟

復(fù)制

1. 平衡：  

   - 細(xì)胞培養(yǎng)板室溫平衡15分鐘（減少溫度梯度）  

2. 校準(zhǔn)：  

   - 空insert測量3次→儀器自動計算背景電阻  

3. 檢測：  

   - 電極垂直浸入液面1-2mm  

   - 穩(wěn)定讀數(shù)（波動<2%持續(xù)5秒）后記錄  

2.3 數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理

TEER計算公式：

TEER (Ω·cm2) = (R_sample - R_blank) × 膜面積(cm2)

示例計算：

復(fù)制

測得電阻：350 Ω  

空白電阻：80 Ω  

Insert面積：0.33 cm2  

→ TEER = (350-80)×0.33 = 89.1 Ω·cm2  

三、性能驗證與問題排查

3.1 質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

合格指標(biāo)：

? 空白電阻CV<5%（同批次inserts）

? 標(biāo)準(zhǔn)電阻液（100Ω）測量誤差<2%

? Caco-2單層第7天TEER≥300 Ω·cm2

3.2 典型問題診斷

現(xiàn)象 可能原因 解決方案

讀數(shù)漂移 電極污染/氣泡干擾 清潔電極/輕敲除氣泡

TEER值異常低 細(xì)胞單層破損 顯微鏡檢查完整性

負(fù)值顯示 空白未校準(zhǔn)/電極反接 重新校準(zhǔn)/檢查電極方向

3.3 應(yīng)用案例數(shù)據(jù)

案例1：腸道屏障藥物評估

結(jié)果示例：

復(fù)制

對照組：420±35 Ω·cm2  

藥物X處理：180±22 Ω·cm2（p<0.001）  

案例2：BBB模型優(yōu)化

TEER動態(tài)變化：

復(fù)制

第3天：85±12 Ω·cm2  

第7天：650±45 Ω·cm2（達(dá)到研究閾值）  

四、技術(shù)問答（Q&A）

Q1：能否用于氣液界面（ALI）培養(yǎng)？

需配合 專用ALI適配器（Cat. MERSALI01），測量前加入50μL PBS潤濕

Q2：如何判斷細(xì)胞單層形成？

TEER達(dá)到平臺期（連續(xù)3天變化<10%）+ 熒光素鈉滲透率<0.5%/h

文檔優(yōu)化建議：

插入 【電極維護(hù)示意圖】 標(biāo)注敏感區(qū)域

添加 TEER計算模板 二維碼（鏈接至Excel工具）

關(guān)鍵步驟用 ??警示框 強調(diào)（如"禁止高壓滅菌電極"）