實驗流程：首先進行抗原修復(fù)，使用檸檬酸鈉緩沖液（pH6.0），在 95℃條件下處理 20 分鐘，以恢復(fù)被固定過程掩蓋的抗原表位 。隨后用含有 5% 驢血清和 0.3% Triton X - 100 的封閉液在室溫下封閉 1 小時，減少非特異性背景染色 。一抗孵育時，將 SMC - 401 按 1:1000 的比例稀釋，在 4℃條件下孵育過夜，確保抗體與抗原充分結(jié)合 。最后采用 HRP 標記的二抗結(jié)合目標抗體，并使用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）進行顯色，注意避免使用金屬增強劑，防止背景染色加深 。預(yù)期結(jié)果在人腦 Lewy 小體染色中，陽性信號呈現(xiàn)為棕褐色顆粒狀沉積，在 40 倍顯微鏡下清晰可見，而白質(zhì)區(qū)域應(yīng)無染色，以此作為背景控制 。