蛋白質(zhì)相互作用分析技術(shù)實現(xiàn)無標(biāo)記實時檢測

內(nèi)容簡介：
本文系統(tǒng)介紹Bio-Rad ProteOn XPR36蛋白相互作用陣列系統(tǒng)在分子互作研究中的技術(shù)優(yōu)勢。詳細解析其表面等離子體共振（SPR）檢測原理、多通道并行分析能力和動力學(xué)參數(shù)測定精度，展示其在藥物篩選和通路研究中的應(yīng)用價值。

正文：
表面等離子體共振技術(shù)無需標(biāo)記即可實時監(jiān)測分子間相互作用。Bio-Rad ProteOn XPR36系統(tǒng)采用創(chuàng)新性的交叉通道設(shè)計，可同時分析36對相互作用，大大提高了檢測通量。

在傳感器芯片設(shè)計方面，系統(tǒng)使用納米級金膜傳感器，SPR角分辨率達0.0001度，對應(yīng)質(zhì)量靈敏度為1pg/mm2。微流體系統(tǒng)采用層流技術(shù)，樣品消耗量僅需50μL，流速控制精度±0.25%。溫控系統(tǒng)精度達±0.005℃，確保動力學(xué)測量的準(zhǔn)確性。

在動力學(xué)分析方面，系統(tǒng)可實時監(jiān)測結(jié)合和解離過程，自動計算結(jié)合速率常數(shù)（ka）、解離速率常數(shù)（kd）和平衡解離常數(shù)（KD）。檢測范圍涵蓋高速結(jié)合（ka>106 M-1s-1）到高親和力結(jié)合（KD<1pM）。數(shù)據(jù)質(zhì)量指標(biāo)Rmax值誤差<5%，χ2值<2，符合高質(zhì)量數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)。

應(yīng)用研究顯示，在抗體藥物篩選中，系統(tǒng)可在6小時內(nèi)完成36種候選分子的親和力測定，KD值測定精度達±10%。在信號通路研究中，可同時分析多個蛋白質(zhì)的相互作用網(wǎng)絡(luò)，為系統(tǒng)生物學(xué)研究提供重要工具。

關(guān)鍵詞： 表面等離子體共振、蛋白質(zhì)相互作用、無標(biāo)記檢測、動力學(xué)分析、高通量篩選